p16和PCNA在胶质细胞瘤中的表达及意义

临床医学论文-P16和PCNA在胶质细胞瘤中的表达及意义 【关键词】 胶质细胞瘤 【摘要】目的 了解胶质细胞瘤中P16和PCNA表达概况 探寻pl6和PCNA 在胶质细胞瘤及正常脑组织中的表达差异，初步分析其临床意义。方法 通过免 疫组织化学法检测胶质细胞瘤及正常脑组织中基因P16和PCNA的表达。结果 胶 质细胞瘤组织中P16的阳性表达率为52.5 正常脑组织中pl6的阳性表达率为 100两者比较差异有非常显著性PV0.001。「16的阳性表达与胶质细胞瘤分化 有关P0.01。PCNA在胶质细胞瘤中的高表达率为80，正常脑组织中未见高表 达率。两者比较差异有非常显著性P0.01。PCNA的高表达与胶质细胞瘤分化有 关P0.05。结论 基因P16和PCNA表达异常是胶质细胞瘤产生的机制之一， 与胶质细胞瘤的发生及发展有关。 【关键词】 胶质细胞瘤；基因；P16 PCNA ；免疫组织化学法 pl6 and PCNA expression profiles in glioma and its clinical significance [Abstract] Objective To investigate the expression of gene pl6 and PCNA and to demonstrate their expression difference in glioma and in normal brain tissue and to uate its clinical significance.s Immunohistochemistry s were used to analyze the expression of PCNA and pl6 in glioma and in normal brain tissue.Results The rate of pl6 positive expression in normal brain tissue and glioma were 100 and 52.5 respectively.There was significant difference between brain normal tissue and glioma P0.001,and it was related to the differentiation of glioma.PCNA was higher expression in glioma compared with normal brain tissueP0.001，and it was related to the differentiation of glioma P0.05 .Conclusion pl6 and mutation PCNA are involved mainly in glioma carcinogenesis. [Key words] glioma;gene;pl6;PCNA;immunohistochemistry 人脑胶质细胞瘤是威胁人类健康的恶性肿瘤，在我国发病率及死亡率呈上升 趋势。此瘤中有多种癌基因激活、抑癌基因失活及其蛋白改变〔1〕。本研究利用 免疫组化检测胶质细胞瘤组织中P16和PCNA的表达，探讨它与胶质细胞瘤发生发 展及临床病理因素的关系。 1材料与方法 1.1材料 随机收集我院神经外科2002年1月〜2004年10月胶质细胞瘤手 术切除组织40例，男26例，女14例。年龄18-62岁，平均39.7岁。胶质瘤I〜 II级18例，IH〜IV级22例。所有患者在手术后取肿瘤组织用福尔马林固定，石 蜡包埋，4 “ m连续切片 分别做HE及免疫组化染色。所有患者术前未接受过任何 放疗、化疗及免疫治疗，术后均经常规组织病理证实。同时收集40例正常脑组织 作为对照，取材于外伤、蛛网膜囊肿等非肿瘤患者非功能区脑组织。 1.2试剂来源S-P免疫组化试剂盒和pl6及PCNA抗体为上海基因有限公司 产品。 1.3实验方法 免疫组织化学法按试剂盒说明书操作，抗原修复采用水煮沸 法，用动物血清代替一抗作为阴性对照，用扁桃体组织作为P16阳性对照，用胃 癌组织作为PCNA阳性对照。 1.4阳性结果判断pl6主要在细胞核或在胞膜、胞质中出现棕黄色颗粒为 阳性，PCNA组织切片以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性。用半定量方法随机选择10 个高倍视野计数，P16计算阳性细胞百分比m 10为-，11〜25为，26〜50 为，50为。PCNA用增殖指数表示，即PCNA阳性细胞占肿瘤细胞的百 分率，并把它分为4级I级为125 ； II级为2650 ； IH级为5175 ； IV级为75以上；其中I〜II级视为弱阳性，miv级视为强阳性。 1.5统计学方法 率的统计学差异显著性采用％ 2检验。 2结果 2.1 P16蛋白在胶质细胞瘤中的表达P16蛋白阳性着色定位于细胞核和细 胞浆，呈黄色或棕黄色颗粒。在正常脑组织中，染色较深，弥漫分布。肿瘤组织 中颜色较浅，范围窄，甚至未见染色。40例正常脑组织中，pl6染色阳性率为100， 40例胶质细胞瘤组织中pl6阳性表达率为52.5。与正常脑组织相比，两者差异 有非常显著性P0.001，pl6蛋白表达与肿瘤组织分化有关P0.05。见表1。 表1胶质细胞瘤组织及正常脑组织中P16的表达略 2.2 PCNA蛋白在胶质细胞瘤组织中的表达PCNA阳性着色主要位于细胞核， 染成黄或棕黄色。40例胶质细胞瘤组织中均见阳性表达；高表达者（ID〜IV级）32 例，占80；低表达者（I〜II级）8例，占20 40例正常脑组织中未见强阳性表 达。胶质细胞瘤组织中PCNA高表达高于正常脑组织，两组比较差异有非常显著性 （P0.001）。胶质细胞瘤组织中PCNA高表达与肿瘤组织分化有关（P0.05），见 表2。 表2胶质细胞瘤组织及正常脑组织中PCNA的表达（略） 2.3 p 16与PCNA的相互关系21例p 16阳性表达的胶质细胞瘤中PCNA高表 达为17例，19例pl6阴性表达的胶质细胞瘤PCNA高表达为15例，％ 2检验显示 P16阳性表达与PCNA阳性表达无相关性（P〉0.05）。 3讨论 3.1胶质细胞瘤中P16表达及意义 近年来有关细胞周期调控与肿瘤发生发 展的关系是肿瘤研究的一个热点。P16为新发现的抑癌基因，属于细胞周期负性调 节因子成员，是CDK4或CDK6的特异性抑制因子，能阻止细胞尤其是带有损伤DNA 的细胞进入S期，从而控制细胞分裂。当P16蛋白缺失时，其不能有效抑制CDK4 活性，进而解除了 pRb对转录因子E2F的抑制，不能阻止细胞由G1期向S期过渡， 导致细胞过度增殖并发生恶性变〔2，3〕。本试验结果提示，P16蛋白的表达状况 与胶质细胞瘤的发生有关，是胶质细胞瘤发生过程中的早期事件，且与胶质细胞 瘤的恶性