cd4cd25fop3调节性t细胞在衰老过程中的变化及与肺癌的关系探讨
苏州大学 硕士学位论文 CD4CD25Fop3调节性T细胞在衰老过程中的变化及与肺癌的关 系探讨 姓名祝丽晶 申请学位级别硕士 专业老年医学 指导教师王翎 201105 中文摘要 变化及与肺癌的关系探讨 中文摘要 cccc.cc增龄性变 化与老年肺癌发生发展之间的内在联系及相关的机制。 结果CC髦琢楂械制惠闪雎饰CCC / C,但不同组问肿瘤的体积以及瘤重具 CC. C, CCCCC差异有统计学意义,老年鼠的脾脏细胞中含有高数量的 改变,可能是导致老年肺癌高发病率的原因之一。 者祝丽晶 指导教师王翎 英文摘要 ccc c CC c c CC 甑 CC 曜 CC 十 CCCCC CCCCCC CCCCC ccc CC CC CC CCCCCCCCC. C CC ccc CCCdCC C ccc CCCccc. CCCCCC ccc ccc CCCCC ccc CC ccc ccc CC c cccc. c, CCigCCCCC / ccgs CCCCCCC ccc CCCCCCC cCC甑CC通CC十CC cccccccc c CCCBCCC, C CCCCCCCCfflC. CC. ccc 培 c ccc CCCCC CC CGCCCCCCCCCC CCCCC CCCCCCCCCCCCH瓦 Ccccccc CCCCCC CC CC 世界卫生组织国际癌症研究机构CCCCCCC CCC CCCCCCCC鹘谛言中细胞红衰老过程中的变化及与肺癌的关系探讨 材料与方法 CC实验动物 CC赴C喋CC鸵鹊鞍酌福好拦1CC公司。 CCCCC缀退卮炕疼CC獴CCCC / C CCC,固定剂 CCCC / CCCCCCCC cccc / CCCCCCCC CCCCCCC好拦胴CCCCC公司。 门碇门电泳级i河啪ii公司。 ii, i. i ii赴并票i洌好拦鹤ii公司。 i i臀吕涸忱胄幕i旱鹿fl i i i公司。 ii魇较赴i牵好拦riii i制扩增仪i秃盼。努i i i io凳庇c舛弗追i扩增仪i秃盼。努i i.琼脂糖凝胶电泳仪、凝胶成像仪上海天能科技有限公司。 二、方法 材料与方法 C瓷CC肺癌细胞的复苏、传代与冻存 CC细胞的复苏 CC. C宕餐幼岛褪痔祝C右旱U嘀腥)蜜坝虫襄CC肺癌细胞的冷冻管,迅速放 超净台内用无菌镶子拧开瓶盖,吸取细胞悬液至一无菌的离心管中,加入含有C 中,置于CA温箱中培养。 CC细胞的传代 离心CC,弃去上清, C取一套血球计数板,将特制的盖玻片盖在血球计数槽上; ii细胞的冻存 后移入离心管,ill疡I,离心ii。 11蜻乃茄邛急i i肺肿瘤模型的建立 辐照过的刨花挚料,标准固体饲料i伤罩荽箭i笛槎I锚行奶昴L经钻I辐照后 CCC/CCCCC,洗去细胞中胰蛋白酶和培养液中血清等成分,用台盼蓝拒染法 获细胞悬液。 CC ccc. ccc CCCCC 向C4魇焦茎屑尤tic的固定/破膜工作液,漩涡混匀,CC苴夥跤CCC。 材料A方法 AA麟A的提取 AA实验前准备 AA AA. A樱AA姓A渲腥)鲂右胪钠Ci赴AA椅路胖AAA。 AA. A蛭鲜鎏Cl赴A屑尤ftAAAAAA,用移液枪反复吹吸直至无明显沉淀, 室温静置AA。 AA。 沉淀。 水溶解沉淀,必要时可用移液枪轻轻吹打沉淀,待AA恋磔耆A芙攵罂芍糜AA{ AA在冰上配AAA从A海A捎AAA体系。 A1AAAAA AAA AAAA A AAAA AA AA采用AAAAA软件设计AAAaAAAA引物系列见表A,并山上海闪 晶生物科技有限公司合成。 A aaaaaaaaaaaaaa AA从AA反应液配制需在冰上进行AA捎AAA iiBiit mm ii上进行,反应条件如下 i涸■湫iiT i蒸i反应ii iimii ii统计学处理 II统计学软件进行数据分析,结果用均数V标准差I士i表示,健 康组与肿瘤组组间比较采用独立样本,检验,同一组内不同年龄间比较采用单因素方 一、肿瘤模型的建立 CC露瑟蘸蠹覆 CC 兰CC 重最人值;E表示瘤重中位数;医顶线和底线分别表示上下四分位数 流式细胞分析法测得六组小鼠的脾脏中CCCCCCCCCC喽允CC见表 cccc c c co cc cc Co锄间 c粉c c. cc cc c CCCC C残 cc c 僻,c 嬴’ CT肿恿MCCCC. C孜k请殳獗瓯受c cccc 哪 蝴 ㈣ ㈣ 锄 蝴 蝴 ㈣ 蝴C筋,,C.C .0 CCC顼0璃 CCC埃C州眦口 C芭CCC蕖啊簸 C尊E澄 C褐蔓CC掰Jgc渡骸i贬怠妊,CCCiC淞C 图C标准曲线图 cCC壬肖C. CCC CCCCCCCC鹘谛言中细胞在衰老过程中的变化及与肺癌的关系探讨 C槌包雕CC基因相对表达量比较 均数E标准差 C. CC. C C. CC. C 豳 CCM1 CC iC CeWC基因相对表达量比较 肿瘤坏死因子受体CCC、高水平CC和中/低水平的CCC、趋化因子受体 是色氨酸代谢必需的酶,由于CC幕辑CCC褂卫肽E彼微C雄调,蛋白质合成受 肿瘤部位和脾脏出现分泌CC沟胴细胞,使肿瘤消退。 CCC. CCMC]介导免疫抑制。C. C通过几种机制参与免疫抑制IC. C可以抑制活 c类分子cc俊。泊碳。蜃蜿cc走cci事洞际苟滩cc,进而影响抗原递呈 c c, cc复,。. 三、增龄cbccccccccc的关系 体随年龄增长逐渐出现的免疫功能下降可能与该细胞的增龄性变化有关,并进一步验 CC增龄性增多的原因与CC恒在老年机体内的积累有关CC。CC等[C]的研究发 有的实验研究结果可以认为,对于老年人如果能够控制该细胞数量的递增,将有助于 我们在建立CCC伟c P偷幕Cs希C C魇较赴C酢A凳庇。舛CC等 是导致