同济考博-分子生物学真题-答案

同济医科高校2001年分子生物学（博士） 一、英汉互译下列名词，并加以说明30分 1、transposable element 转座子基因组中可移动的DNA分子，在真核生物的基因和基因组进化中起着重要的作用。 2、restriction enzyme 能够特异性识别dsDNA序列，并且能够在识别位点及其四周切断DNA的核酸内切酶 3、derepression 去阻扼阻遏蛋白从启动子，操纵子区脱离，解除抑制。染色质去阻扼后出现的开放构象，能促进基因转录。例如，乳糖操纵子中，乳糖与阻遏蛋白结合，变更阻遏蛋白的构象，使之不再与操纵基因结合，RNA-pol II就与启动子结合，起先转录翻译出三种酶，乳糖就是阻遏蛋白与操纵子分别的诱导物。 4、gene therapy 基因治疗是以变更人的遗传物质为基础的生物医学治疗，用肯定方法病毒载体，非病毒载体将正常人野生型基因或有治疗作用的基因导入患者靶细胞内，从而置换或者矫正致病基因的一种治疗方法。 5、calmo dulin 钙调蛋白钙调蛋白是真核生物细胞胞质溶胶蛋白，由148个氨基酸组成单条多肽，16.7kDa。一种能与钙离子可逆结合的蛋白质。钙离子被称为细胞内的其次信使，其浓度变更可调整细胞的功能，这种调整作用主要是通过钙调蛋白而实现的。 6、操纵子 指包含结构基因、操纵基因以及启动基因的一些相 操纵子邻基因组成的DNA片段，其中结构基因的表达受到操纵基因的调控。主要见于原核生物，但在真核生物中也存在。 7、反式作用因子 一些细胞核内蛋白质可以与顺式作用原件和RNA-pol相互作用，来调控基因转录。Cis-acting element 真核基因非编码区中能够调控基因转录的DNA序列，包括启动子，增加子，缄默子。 8、基因组 一个细胞，或生物体内的全部基因，全部遗传信息。 9、原癌基因 细胞癌基因，正常状况下静止或极少表达，其表达产物对于细胞生长、分化、增殖有重要作用。一旦激活可以导致细胞恶变，诱发肿瘤的基因。激活方式有点突变、获得启动子、基因扩增、染色体易位或重排。 10、多克隆位点载体中有多个限制性内切酶的识别位点，能够插入多个外源基因并且能否复制的位点。 二、试述反式作用因子的结构特征及作用方式20分 Trans-acting factor是一类细胞核内的蛋白质因子，能够与顺式作用元件和RNA-pol相互作用，调整基因转录活性。一般含有DNA结合结构域和转录活化结构域。 DNA结合结构域（1） Helix-turn-helix 含有3个helix，其中helix3与DNA识别结合，helix1和helix2与其它蛋白质结合。（2）Zenic finger锌指结构由相对保守的一段氨基酸序列和锌离子结合，形成相对独立的功能域，像一根手指插入DNA的大沟。两种类型的DNA结合蛋白有这样的模序，一是锌指蛋白，另一个是甾体受体。（3）Leucine Zipper亮氨酸拉链，两个蛋白质之间相互作用，共同建立一个转录复合体。是一种富含亮氨酸的蛋白质形成的二聚体motif。这种motif可以识别特殊的DNA序列。两个亮氨酸拉链区的反式作用因子依靠疏水力气相互结合，N-端有碱性氨基酸构成的a-helix能够与DNA结合。Eg AP1与SV40增加子的结合（4）helix-loop-helix 兼性a-helix具有疏水面和亲水面，两个具有这种的motif反式因子可以形成dimer。仅靠helix的N-端有一段富含碱性氨基酸的序列可以与DNA结合。HLH以同二聚体或者异二聚体作用于顺式作用元件。（5）同源异形结构域homeodomain, 同源异性盒是一种编码60aa的序列，长180bp，几乎存在于全部真核生物中。 转录激活域与其他转录因子相互作用的结构成分。常见的转录激活结构域有富含谷氨酰胺结构域，富含脯氨酸结构域及酸性α螺旋结构域。 三、试述2型限制酶的功能与特性20分 Ⅱ 型酶相对来说最简洁，它们识别回文对称序列，在回文序列内部或旁边切割 DNA ，产生带 3- 羟基和 5- 磷酸基团的 DNA 产物，需 Mg2 的存在才能发挥活性，相应的修饰酶只需 SAM 。识别序列主要为 4-6bp ，或更长且呈二重对称的特殊序列，但有少数酶识别更长的序列或简并序列，切割位置因酶而异，有些是隔开的。 ① 有特异识别和切割的序列部位 ② DNA分子上两个单链断裂的部位通常不是干脆相对的 ③ 断裂所形成的DNA片段常具有碱基互补的单链尾巴（粘性末端） ④ 内切酶的切割和修饰功能由两个不同的酶催化所完成，即内切酶活性和甲基化作用活性是分开的 四、试述影响原核基因转录的因素20分 原核基因表达调控与真核存在很多共同之处，但因原核生物没有细胞核和亚细胞结构，其基因组结构要比真核生物简洁，基因表达的调控因此而比较简洁。虽然原核基因的表达也受转录起始、转录终止、翻译调控及RNA、蛋白质的稳定性等多级调控，但其表达开、关的关键机制主要发生在转录起始。其特点包括以下3方面（1）σ因子确定RNA聚合酶的识别特异性原核生物只有一种RNA聚合酶，核心酶催化转录的延长， 亚基识别特异启动序列，即不同的 因子帮助启动不同基因的转录。（2）操纵子模型的普遍性除个别基因外，原核生物绝大数基因按功能相关性成簇地连续排列在染色体上，共同组成一个转录单位即操纵子，如乳糖操纵子等。一个操纵子含一个启动序列及数个编码基因。在同一个启动序列限制下，转录出多顺反子mRNA。（3）阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性在很多原核操纵子系统，特异的阻遏蛋白是限制启动序列活性的重要因素。当阻遏蛋白与操纵基因结合或解离时，结构基因的转录被阻遏或去阻遏。原核生物在细胞质内转录，转录和翻译同时进行。 五、试述病毒核酸的结构特点10分 （1）病毒内的核酸结构相对简洁，其遗传物质可以是DNA或者RNA，也有阮粒病毒以蛋白质作为遗传物质，成熟的病毒内只有一种遗传物质，要么是DNA，要么是RNA。（2）病毒基因可以连续也可以中断，很少有重复序列。病毒基因组大部分是用来编码蛋白质的，其编码区大于901。非编码区较少。非编码区通常是基因表达的调控区（3）有重叠基因存在，使得较小的基因片段可以携带较多的遗传信息。（4）病毒基因组是单倍体，功能相关的蛋白质基因常常丛集于基因组的一个或者多个特定部位，形成一个功能单元或者转录单元。 华中科技高校同济医学院2002年攻读博士学位探讨生入学考试试题 考试科目分子生物学（基础课）科目代码811 一名词说明并写出对应的英文名词（共10小题，每小题5分，共50分） 1.克隆载体 2.表达载体 3.假基因 4.微卫星序列 5.回文结构 6.启动子 7.癌基因 8.多克隆位点 9.增加子 10. 开放阅读框架 1.克隆载体为“携带”感爱好的外源DNA、实现外源DNA的无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采纳的一些DNA分子。一般为质粒或者噬菌体。 2.表达载体为使插入的外源DNA序列可转录、进而翻译成多肽链而设计的克隆载体 3. 假基因多基因家族中，某些