Tiam1及MMP-14在宫颈癌中表达临床意义

Tiaml及MMP-14在宫颈癌中表达临床意义 ［摘要］目的检测Tiaml和MMP-14在宫颈鳞癌、宫颈上 皮内瘤变和正常宫颈中的表达，了解其在宫颈鳞癌的发生发 展以及浸润转移方面的作用。方法收集某院病理科2010 年6月〜2012年6月手术切除宫颈鳞癌标本100例，宫颈上 皮内瘤变30例，正常宫颈10例。采用免疫组化二步法检测 两者在宫颈组织中的表达情况。采用SPSS18.0软件包进行 统计分析。结果Tiaml在宫颈鳞癌中的表达高于CIN和正 常宫颈P 0.01； Tiaml的表达与分化程度、深肌层浸 润和淋巴结转移有关P 0.05； MMP-14在宫颈鳞癌的表 达高于CIN和正常组织，且在CIN的表达亦高于正常组织P 0. 05； MMP-14的表达与深肌层浸润和淋巴结转移有关P 0. 05；两者在宫颈鳞癌的表达强度呈正相关。结论 Tiaml与MMP-14可能都参与了宫颈鳞癌的恶性发展过程，且 与宫颈癌的深肌层浸润、淋巴结转移密切相关。两蛋白可能 在宫颈鳞癌的发生发展过程中具有协同作用，表达阳性的癌 细胞可能具有更强的浸润转移的潜能。 ［关键词］Tiaml； MMP-14；宫颈鳞癌；免疫组化 ［中图分类号］R737. 33 ［文献标识码］B ［文章编号］ 1673-9701 2012 28-0056-03 T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1 T lymphoma invasion and metastasis factor 1, Tiaml）属于原癌基因，具有影响细 胞形体极化、调节细胞骨架重组、促进细胞运动和迁移、参 与基因表达调控等多种生物学功能［1］。膜型I型金属蛋白 酶 （memberane type I matric metalloproteinase MT1-MMP/MMP-14）是基质金属蛋白酶家族的一个亚族，属于 一种跨膜蛋白水解酶，能降解细胞外基质、基底膜、细胞因 子、生长因子受体以及生长因子连接蛋白等而在肿瘤细胞的 浸润、转移中发挥重要作用［2］。本文通过检测Tiaml与 MMP-14在宫颈癌的表达，旨在探讨其表达与宫颈癌之间的关 系，并分析其可能的分子机制。 1对象与方法 1. 1研究对象 收集某医院病理科2010年6月〜2012年6月由手术切 除并经病理学证实为宫颈鳞癌的石蜡标本100例，全部病例 术前均未做放、化疗等治疗，年龄27〜68岁，中位年龄45 岁。收集宫颈上皮内瘤变（CIN） 30例，同时取因妇科良性 病变而行子宫全切的正常宫颈10例作为对照。所有标本均 经4甲醛固定后常规石蜡包埋，5 um切片后HE染色，并 由资深病理医师重新进行光镜下确诊。 1.2主要试剂 兔抗人Tiaml多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司， 鼠抗人MMP-14单克隆抗体、PV-6000试剂盒和二氨基联苯胺 （DAB）显色剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 1.3免疫组化染色及评分 采用二步法进行免疫组化染色，严格按照试剂盒说明书 进行操作，DAB显色后行苏木素复染。用PBS代替一抗作为 阴性对照。显色判断Tiaml和MMP-14于肿瘤细胞胞浆呈棕 黄色颗粒着色，在高倍视野下（X400）进行显色评分。首 先根据着色细胞百分率计分细胞质无染色为0分，＜25 为1分，2650为2分，51〜75为3分，＞75为4分； 同时根据染色强度计分淡黄色1分，棕黄色2分，棕褐色 3分（染色深浅需与背景着色相对比）［3］。每个病例观察 10个高倍视野，每项得分各取其平均值，最后总得分为两项 相加的和阴性（一）V2分；阳性2〜7分；低表达（ ） 2分；中等表达（） 34分；高表达（） 5〜7分。 1. 4统计学分析 所有数据采用SPSS18. 0统计软件进行分析，P ＜ 0.05 认为有差异统计学意义。Tiaml和MMP-14的表达以及与宫颈 鳞癌临床病理学参数之间的关系采用x2检验分析，两蛋白 的关联密切程度用Spearman秩相关分析。 2结果 2. 1 Tiaml和MMP-14在宫颈各组织类型中的表达 Tiaml在宫颈鳞癌中表达86例（86）, CIN中表达15 例（50）,正常宫颈组织中表达2例（20）。其在宫颈鳞 癌的表达与CIN中的表达相比较差异具有统计学意义P 0.000；宫颈鳞癌的表达与正常宫颈组织的比较差异具有统 计学意义P 0.000；在CIN中的表达与在正常组织的表 达差异无统计学意义P 0. 097o MMP-14在宫颈鳞癌中表达78例78, CIN中表达14 例46.7,正常宫颈组织中表达1例10。其在宫颈 鳞癌的表达与CIN中的表达相比较差异具有统计学意义P 二 0.001；宫颈鳞癌的表达与正常宫颈组织的比较差异具有统 计学意义P 0.000；在CIN中的表达与在正常组织的表 达差异具有统计学意义P 0. 038o见表1。 表ITiaml与MMP-14在宫颈各组织类型的表达[n ] 2.2 Tiaml在宫颈鳞癌中的表达与临床病理参数的关系 Tiaml的表达与组织分化程度、深肌层浸润以及淋巴结 转移比较，差异具有统计学意义P 0. 05；与年龄和肿 瘤大小无关P 0. 05o见表2。 2. 3 MMP-14在宫颈鳞癌中的表达与临床病理参数的关系 MMP-14的表达与深肌层浸润和淋巴结转移比较，差异具 有统计学意义P 0. 05；与年龄、组织分化程度和肿瘤 大小无关P 0. 05o见表3。 2.4 Tiaml、MMPT4在宫颈鳞癌中的相关性 宫颈癌组织中，Tiaml与MMP-14两者表达强度经 Spearman秩相关分析得出，两者在宫颈癌中表达强度呈正相 关r 0. 335, P 0. 000o 3讨论本实验结果显示，Tiaml在宫颈鳞癌中的表 达率高于CIN且高于正常宫颈组织，差异均具有统计学意义 P 0.01,提示Tiaml可能参与宫颈鳞癌的恶性转化过 程。同时观察到，Tiaml的表达与组织分化程度、深肌层浸 润以及淋巴结转移有关P 0. 05,这提示我们，组织分 化程度越低，Tiaml的表达率越高；有深肌层浸润组、淋巴 结转移组的Tiaml表达率高于无深肌层浸润和无淋巴结转移 组的表达率。Tiaml的表达与年龄和肿瘤大小无关P 0. 05o该研究结果说明，Tiaml表达阳性的宫颈癌细胞可能 具有更强的侵袭转移能力。与之相似，有研究表明，Tiaml 在鼻咽癌、胃癌、肝癌、前列腺癌等多种恶性肿瘤中呈阳性 表达，且其阳性表达与组织的分化程度、侵袭转移等密切相 关[4-7]o 本研究亦观察到，MMP-14在宫颈鳞癌的表达高于CIN和 正常组织，且在CIN的表达亦高于正常组织，差异均具有统 计学意义P 0. 05o MMP-14的表达与深肌层浸润和淋巴 结转移有关P 0. 05提示，其在有深肌层浸润、淋巴 结转移组的表达率高于无深肌层浸润、无淋巴结转移组的表 达率。MMP-1