MH培养基配制标准操作规程

M-H培养基配制标准操作规程 1. 目的 规范M-H培养基配制标准操作规程，保证培养基质量。 2. 原理 M-H培养基用Mueller-Hinton琼脂（水解酪蛋白琼脂） 配制，淀粉为保护性胶体，能对抗细菌中的毒性物质，水解 酪蛋白含多种氨基酸，牛肉浸膏能提供细菌氮源的主要营养 物质。药敏试验中，为保证结果重复性及抑菌环的大小、清 晰，因此培养基不含对抗生素及磺胺药物的拮抗剂。 3. 用途 用于普通细菌的抗菌药物敏感试验。 4. 配方 成品 OXOID M-H 干粉 38g、蒸馅水 1000ml,pH7.l-7.5o 5. 操作步骤 将上述成分混合，校正pHo 12FC高压灭菌15分钟。 冷至50C左右，无菌定量吸取25ml于直径9cm的无菌平板 内，凝固后冷藏备用。琼脂层厚4mm. 6. 储存条件 2〜8 C冰箱。 7. 有效期 实验室自行规定，确保培养基质量。 8. 质量控制 8.1质控频度每次新配制时做质控 8.2质控方法及结果见表5-20. 表5-18配制M-H培养基质量控制方法及结果 试验方法结果 无菌试验 质量检测 平行试验 V100块抽检5, 100块随机取10块，35C, CO2培养24小时 在M-H培养基上涂布粪肠球菌ATCC29212,用甲氧节嚏/ 磺胺甲嗯纸片进行药敏试验，35C培养24小时 做质控时，取新旧批号的培养基同时做无细菌生长 出现一个边缘清楚的抑菌圈，直径应M20mm 9. 注意事项 9.1倾注琼脂量为25ml,平板深度4mmo若太薄，易 产生假敏感。若太厚，平皿中的抗生素往下扩散而使抑菌环 变狭窄，产生假耐药性。 9.2 pH会影响某些抗生素的活性。实验时不可将平板 培养在CO2培养箱中，否则会在琼脂的潮湿表面产生碳酸而 降低pH值，将影响各种抗生素的扩散速度、抑菌环大小。