3.紫外分光光度法测定苯酚

试验四 紫外分光光度法测定苯酚 1.目的要求 ⒈学会运用UV-2102PC型紫外可见分光光度计。 ⒉驾驭紫外光谱法定量分析方法与原理。 2．基本原理 苯酚在220-380nm处具有特征汲取，因此其含量可用紫外分光光度计作测定，不需进行显色反应，方法简便，快速，且精确度高。 3. 仪器与试剂 ⒈仪器UV-2102PC型紫外可见分光光度计； 10mL吸量管1只； 50mL容量瓶7个 ； 100mL容量瓶5个。 2.试剂0.250g/L苯酚标准溶液 精确称取25.0mg分析苯酚，溶于适量水中，全部转移至100mL容量瓶中，用纯水稀释至刻度，摇匀。 4. 试验步骤 ⒈绘制汲取光谱图和选择测量波长 用吸量管取4mL0.250g/L苯酚标准溶液于50ml容量瓶中，用纯水稀释至刻度，摇匀。此溶液在UV-2102PC型紫外可见分光光度计上，用1cm石英液槽，以纯水为参比溶液，于波长220-380nm范围内，辨别精度1nm，绘制汲取光谱图，并选择测量波长λmax. ⒉绘制标准曲线 取5只50mL容量瓶，由吸量管分别加入2.00、4.00、6.00、8.00、10.0mL0.250g/L苯酚标准溶液，以纯水稀释至刻度。摇匀。得一系列苯酚标准溶液。 用1cm石英液槽，以纯水为参比溶液，在选定波特长测上列各标准溶液的吸光度。绘制标准曲线。 ⒊试样溶液的测定 用移液管取适量试样溶液于50mL容量瓶中,按上述步骤2配制溶液并测定吸光度。平行测定二份。（黑体字部分试验报告中请按自己实际操作撰写） 5．数据处理 ⒈依据试验所苯酚汲取光谱曲线，运用理论学问依据汲取谱带的位置形态及汲取强度（摩尔吸光系数），对所做谱图进行解析，推断苯酚紫外光谱的汲取带与跃迁类型。 2绘制标准曲线，并由曲线求算试样溶液中苯酚量（mg/L）. 6．问题探讨 本试验测定时能否用玻璃液槽代替石英液槽盛放溶液，为什么 紫外光谱试验参考文献 紫外及可见光谱包括有几个谱带系，不同的谱带系相当于不同电子能级的跃迁。 1、远紫外真空紫外汲取带 这一块用的比较少，应当是特别少，一般紫外分光光度计的波长都是从200纳米起先的，因为远紫外真空紫外汲取带被空气剧烈汲取，顾名思义，也叫真空紫外。 主要是烷烃化合物的汲取带，如C-C、C-H基团中，为δ→δ＊跃迁，最大汲取波长小于200纳米，范围在10-200纳米。 2、末端汲取带 饱和卤代烃、胺类或含杂原子的单键化合物的汲取带，由于这类化合物含有一个或几个孤对电子，因此产生n→δ＊跃迁，其范围从远紫外区末端到近紫外区，在200纳米旁边。 所以，一般在紫外区扫描或全波长扫描的时候，建议从210纳米起先，因为许多物质都存在末端汲取，多扫了没有多大意义，从节约时间和氘灯的角度考虑，建议从210纳米起先扫描。 3、R带 这个汲取属于弱汲取带，但是溶剂效应比较明显，所以提示在选择溶剂的时候肯定要留意。 R带是共轭分子的含杂原子基团的汲取带，如CO，NO，NN等基团，有n→π＊跃迁产生，为弱汲取带，摩尔吸光系数K一般小于100L.mol-1 -1；随着溶剂极性的增加，R带会发生蓝移，旁边如有强汲取带，R带有时会红移，有时可能视察不到。 4、K带 这个用的比较多，也是有机物定性定量的基础，其最大汲取往往是由K带确定的，一般来说，假如某物质存在共轭双键，从理论上来将都可以用紫外去定性定量的，所以建议要特殊留意K带。 共轭体系的π→π＊跃迁所产生的汲取带，如共轭烯烃，烯酮等。K带的汲取强度很高，一般K大于10000L.mol-1 -1。 5、B带 理论支持芳香和杂环化合物π→π＊的特征汲取带。苯的B汲取带在230-270纳米之间，并出现包含有多重峰或精细结构的宽汲取带这也是为什么有馒头峰的缘由。但取代芳香烃的B带精细结构会消逝，极性溶剂也会使精细结构消逝。 6、E带 含有苯环的物质一般在B带和E带有汲取，但是B带的汲取远远K带剧烈，就以山梨酸和苯甲酸为例，相同浓度的山梨酸的汲取特殊剧烈，最大汲取很明显，可是苯甲酸的却象馒头峰，最大汲取特不明显，只有通过求导才能找出最大汲取来，比较郁闷。这也可以从吸光系数看出来，B带的吸光系数为250-300 L.mol-1 -1，感觉不是很灵敏。E带汲取系数大，但由于E和B的作用，往往峰形不太好，不利于分析。 也属于芳香结构的特征汲取，由处于环状共轭的三个乙烯键的苯型体系中的π→π＊跃迁所产生。E带又分为E1和E2带。E带属于强汲取带，K大于10000 Lmol-1 -1 五．试验数据处理。 1.依据试验所绘制的苯酚汲取光谱曲线，运用理论学问依据汲取谱带的位置形态及汲取强度（摩尔吸光系数），对所做的谱图进行解析，推断苯酚紫外光谱的吸带与跃迁类型。 答由图中苯酚的汲取曲线知ƛmax270nm,A0.2570,依据朗博比尔定律AƐcb其中A吸光度；Ɛ摩尔汲取系数，单位L.moL-1 -1；;C样品的物质的量浓度（moL/L）；b液层厚度，单位cm得Ɛ；代入A0.2570，b1,c4x 0.158/50g/L1.264x10-2moL/L（M苯酚94.11g/moL）得Ɛ1913.45 L.moL-1 -1。 由ƛmax270nm,Ɛ1913.45L.moL-1 -1该物质在270nm（Ɛ1913.45 L.moL-1 -1）的汲取带是由π-π*跃迁产生的B带B汲取带是苯环的特征汲取带在230270是一个宽峰是跃迁概率较小禁阻跃迁产生的弱汲取带,包含多重峰，当苯环上连有发色基团-OH时B 带的精细结构消逝，峰变包，并且产生红移，摩尔汲取强度增大。 2绘制标准曲线，并由曲线求算试样溶液中苯酚的含量（mg/L）。 答由试验数据ƛ270nm条件下测未知试样的浓度如下表 编号 浓度 1 2 3 平均值 C/mg/L 22.9762 22.9435 23.1156 23.0117 C试样苯酚23.011750mg/L1150.585mg/L 六试验思索题。 本试验测定时能否用玻璃液槽盛放溶液，为什么 答不行，玻璃比色皿与石英比色皿的透光率不同，一般在外光区用石英比色皿，可见光区用玻璃比色皿，石英比色皿可用在全波段，玻璃比色皿只能用于340nm以上波长，因为玻璃不透紫外光（对紫外光有汲取）。