3-050517-实验室质量控制操作规程

艾滋病检测试验室质量管理 试验室质量管理包括质量保证、质量限制和质量评价。 1 质量保证（QA） 1.1 行政支持 行政部门和领导要关切艾滋病试验室的建设和发展，保证明验室负责人和主要技术人员队伍的稳定，保证明验室建筑和设备须要、赐予足够的经费支持，并进行常常性监督检查。 1.2 试验室规范化建设 艾滋病试验室的设置及其建筑、设施、设备必需符合艾滋病检测工作管理方法的要求。 1.3 人员培训及其评价 试验室工作人员上岗前必需接受技术培训并获得合格证书。在工作中要定期或不定期接受复训。试验室主管领导应定期对工作人员进行评价，包括工作的精确性、效率、执行平安条例和规章制度状况、职业道德、出勤率以及上岗资格等。 1.4 标本采集、运输和处理，严格遵照FJCDCXAM001-2005。 1.5 检测方法和试剂的选择 应运用最适合的检测方法和敏感性高、特异性好的试剂，并定期进行质量评价。 1.6 设备维护与校准 设立常用仪器的维护及校准制度，以保证正常运转。 1.6.1 酶标读数仪、洗板机 每天核对酶标仪滤光片波长，检查洗板机管道是否通畅，是否有漏液现象。 每周清洁仪器表面，爱护光学零件不沾灰尘。 每月检查洗涤时各孔是否与相应的冲洗头对位良好，负压是否符合规定要求。 每年检查、清洗滤光片，假如出现裂开或霉点则要更换。依据仪器内具有的校准程序或运用校准板，对滤光片的精密度进行校准并保留记录。 试验过程中发觉异样状况，应随时进行处理，可依据运用状况更换必要的部件。 1.6.2 移液器 一年至少应当标定一次，发觉异样状况应随时进行校准。 标定方法包括有色溶液光谱分析法、称量校准法、同位素计数法以及运用配套校准盒等。校准多道移液器时，必需保证每一个加样头都能够连续、精确地加样。移液器的精密度应在厂家说明书规定的范围内。 范例 用蒸馏水称量法标定移液器 在室温22℃无风的工作室中，在万分之一级别天平上放置一个小三角烧瓶，用待校准的移液器吸取存放过夜的蒸馏水加入烧瓶底部，称重并计算蒸馏水重量，连续称重10次。加蒸馏水的量依据待校准移液器的规格而不同（见下表），10次校准称量均在要求的重量范围内为合格，贴上合格标签，注明校准日期，不合格移液器要请生产厂家进行校准。填写和保存校准记录。 称重法校准移液器方案 移液器规格 蒸馏水量 要求重量范围 0.5–10μl 2μl 1.75 - 2.25 mg 5–40μl 10μl 9.8 - 10.2 mg 40–200μl 70μl 69.4 - 70.6 mg 200–1000μl 300μl 298.0 - 302.0 mg 1–5ml 2000μl 1990.0 - 2010.0 mg 2–10ml 3500μl 3485.0 - 3515.0 mg 1.6.3 冰箱和孵育箱 必需每天检查和记录低温超低温冰箱及孵育箱的温度，并作好记录。 1.6.4 定期检查其他仪器设备 精密仪器及出具试验结果的仪器必需定期校准，其他仪器定期检查并做好记录。 1.7 文件和文件管理 1.7.1 标准操作程序 SOP 艾滋病检测试验室要建立覆盖主要工作内容的SOP文件。 SOP由各岗位工作人员起草，试验室主任审定，并应定期修订。修订应当在试验室主管人员（技术负责人）的领导下进行，每年至少一次。全部工作人员要在所从事工作的SOP文件上签名表示已经阅读并驾驭了有关内容。 u 艾滋病检测试验室应建立以下SOP 1）样品的接收、登记和处理 2）检测方法和步骤 3）仪器的运用与维护和校准 4）试验中的质量限制 5）结果说明与报告 6）保密程序 7）检测数据的记录与保存 8）追踪和处理 9）试验室的清理和消毒 10）试验室平安防护 u SOP通常包括（但不限于）以下内容 1）标题和编号 2）编写和修改日期 3）编写和修订人员姓名 4）方法、目的和应用范围 5）相应的职业规范 6）检测设备和试剂 7）平安防护相关步骤 8）结果的说明和报告 9）附录，包括相关的附加文件如标准表格、设备和试剂盒说明书等。 1.7.2 试验原始记录表 应按试验要求，设计操作的原始记录表，标明空白比照、阳性比照、阴性比照、外部比照以及待检样品的位置，便于指导试验人员加样。要注明试剂盒厂家、测定方法、批号、效期、操作人员和复核人员姓名及检测日期。 1.7.3 标本的登记 收到标本后，刚好登记有关参数，包括受检者姓名或代号、试管编号、性别、年龄、职业、送检单位、人群类别、检验结果、送检日期、报告日期、备注 必要时记录通信地址 等。 1.7.4 HIV阳性标本的保存记录 包括HIV阳性标本的类型、贮存量、贮存温度、贮存起始时间以及标本保管人姓名。 1.7.5 文件存档 试验原始记录表、打印数据、免疫印迹试验的膜反应条带或其照片、检测记录表、标本登记、标本保存记录以及仪器设备修理和校准记录等都应当妥当存档保存5年以上。最好同时运用计算机保存各种文件和记录。 2 质量限制（QC） 2.1 质控血清的制备和保存（以ELISA试验检测HIV抗体为例） 在每次试验中必需包含有内部比照质控血清和外部比照质控血清。 内部比照质控血清指试剂盒内供应的阳性和阴性比照血清。内部比照是质量限制的基础。每一次检测必需运用内部比照，而且只能在同批号的试剂盒中运用。 外部比照质控血清是为了监控检测的重复性和稳定性以及试剂盒批间或孔间差异而由试验室设置的一套比照血清，包括强阳性、弱阳性和阴性比照血清。也可以只设置一个弱阳性比照，以该试剂盒临界值（Cut-off）的2-3倍为宜。 2.1.1 外部比照质控血清的制备 HIV抗体阳性和阴性血清，56℃30分钟灭活，3000转/分钟离心15分钟。弱阳性比照可以用HIV抗体阴性血清梯度稀释HIV抗体强阳性血清并标定后得到。按一年运用量配制，用0.2μm滤膜过滤除菌。 2.1.2 外部比照质控血清的保存 1）按一周试验用量分装、分类、标记、封口、-20℃冻存于非自动除霜冰箱中。 2）外部比照血清不行反复冻融，一旦溶化后应当存放2-8℃，供一周内运用。 2.1.3 外部比照质控血清的运用 每一次试验必需运用外部比照质控血清，以便监控试验的重复性和稳定性。同时可以了解各批试剂盒的批间或孔间差异，绘制质量限制图。 2.1.4 外部比照质控物的质量要求 质控物的管间或瓶间变异必需小于监测系统预期的变异，并且质控物的成分应在稳定状态中。质控物应无菌，并不含有影响ELISA反应的防腐剂。 2.2 质控图的建立及应用（以ELISA试验检测HIV抗体为例） 最常用的质控图是Levey-Jennings质控图 2.2.1 建立质控图参数 外部比照质控物的平均值和标准差应建立在试验室常规运用方法对质控物重复测定的基础上。一般采纳在不同批次检测取得至少20个数据；假如仅做少量批次的检测